کلون کردن اپیتوپ های خطی آنتی ژن p۱۴-۳-۳ در وکتور pegfp-n۱ به عنوان یک مدل واکسن dnaجهت القا ایمنی علیه کیست هیداتیک و بررسی بیان آن در رده سلولی cho
نویسندگان
چکیده
زمینه و هدف: کیست هیداتیک در اثر آلودگی با لارو انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس ایجاد میشود. در مرحله لاروی این انگل آنتیژنهای متعددی تولید میشود که یکی از این آنتیژنها، آنتیژنی از خانواده پروتئینهای p14-3-3 میباشد و واکسن نوترکیب آن ایمنی زایی قابل توجهی را در موش القا کرده است. با توجه به ایمونوژنتر بودن نواحی اپیتوپی آنتیژنها و تولید پاسخ ایمنی th1 مطلوب هدف از این مطالعه کلون کردن اپیتوپهای خطی این آنتیژن شناسایی شده در وکتور n1–pegfp بود که در ساخت یک مدل dna واکسن مؤثر بود. روش بررسی: در این مطالعه تجربی پس از شناسایی اپیتوپهای خطی آنتیژن p14-3-3 توسط نرمافزارهای بیوانفورماتیکی، توالی کدکننده آن به صورت سنتتیک فراهم شد، پس از تکثیر با واکنش pcr و هضم توسط آنزیم محدود کننده xhoi، در وکتور n1 – pegfp تخلیص شده با روش سمبروک تغییر یافته که همراه با استفاده از cacl2 وpeg6000 میباشد کلون شده و کلونیهای مثبت حاوی وکتور نوترکیب ابتدا به روش colony pcr و سپس توالی یابی تأیید شد. برای بررسی بیان در سلولهای یوکاریوت با روش الکتروپوریشن به رده سلولیcho منتقل شدند. یافتهها: توالی کد کننده اپیتوپهای خطی آنتیژن p14-3-3 انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس پس از شناسایی، سنتز و تکثیر در وکتورpegfp-n1 که تخلیص آن با روش جدید به خوبی با حداکثر غلظت پلاسمید و حداقل مقدار rna همراه است، کلون شده و پس از تأیید کلونینگ، بیان آن نیز در رده سلولی cho به عنوان نمونهای از سلولهای یوکاریوت به صورت موفقیتآمیز با میکروسکوپ فلورسنت انجام شد و استفاده از سازه حاصل در قالب واکسن ژنی برای بررسی پاسخ ایمنی در مدلهای موشی در مراحل بعدی پژوهش انجام خواهد شد. نتیجهگیری: نتایج حاصل از توالی یابی، تأیید کننده کلونینگ صحیح توالی کد کننده اپیتوپهای خطی آنتیژن ζ p14-3-3 انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس در وکتور pegfp-n1 بوده و نتایج حاصل از میکروسکوپ فلورسانس نشانگر بیان موفقیتآمیز پروتئین نوترکیب در سلول یوکاریوتیcho میباشد. واژه های کلیدی: اکینوکوکوس گرانولوزوس، کلونینگ، dna واکسن،p14-3-3 خش وارد کنید
منابع مشابه
کلون کردن اپیتوپهای خطی آنتی ژن P14-3-3 در وکتور pEGFP-N1 به عنوان یک مدل واکسن DNAجهت القا ایمنی علیه کیست هیداتیک و بررسی بیان آن در رده سلولی CHO
زمینه و هدف: کیست هیداتیک در اثر آلودگی با لارو انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس ایجاد میشود. در مرحله لاروی این انگل آنتیژنهای متعددی تولید میشود که یکی از این آنتیژنها، آنتیژنی از خانواده پروتئینهای p14-3-3 میباشد و واکسن نوترکیب آن ایمنی‌زایی قابل توجهی را در موش القا کرده است. با توجه به ایمونوژنتر بودن نواحی اپیتوپی آنتیژنها و تولید پاسخ ایمنی Th1 مطلوب هدف از این مطالعه کلون کردن ...
متن کاملکلون کردن اپیتوپ های خطی آنتی ژن eg95 اکینوکوکوس گرانولوزوس در وکتور pegfp وبررسی بیان آن در سلول cho
زمینه و هدف: کیست هیداتیک، بیماریی است که ازطریق تخم انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس دفع شده از مدفوع سگ آلوده به انسان و دام منتقل می شود. این انگل، یکی از کرم های نواری خانواده ی taeniidae می باشد که باعث ایجاد مشکلات بهداشتی گسترده در انسان و خسارت های اقتصادی به صنعت دامپروری می شود. بدین منظور، طراحی واکسن به منظور پیشگیری ازبروز این بیماری حائز اهمیت می باشد. مواد و روش ها: در این تحقیق، توال...
متن کاملکلونکردن اپیتوپهای خطی آنتیژن Eg95 اکینوکوکوس گرانولوزوس در وکتور pEGFP وبررسی بیان آن در سلول CHO
زمینه و هدف: کیست هیداتیک، بیماریی است که ازطریق تخم انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس دفع‌شده از مدفوع سگ آلوده به انسان و دام منتقل‌می‌شود. این انگل، یکی از کرم‌های نواری خانواده‌ی Taeniidae میباشد که باعث ایجاد مشکلات بهداشتی گسترده در انسان و خسارت‌های اقتصادی به صنعت دامپروری میشود. بدین منظور، طراحی واکسن به‌منظور پیشگیری ازبروز این بیماری حائز اهمیت میباشد. مواد و روش‌ها: در این تحقیق، توال...
متن کاملکلون سازی و بیان ژن هیرودین نوترکیب در رده سلولی CHO
هیرودین پروتئینی به طول 66-65 اسیدآمینه می باشد که از غدد بزاقی زالو ترشح و به عنوان یک داروی ضدانعقاد مطرح است. این دارو مهارکننده بسیار قوی ترومبین بوده و در ممانعت از ترومبوسهای عروقی موثر است. هدف از این تحقیق بررسی بیان ژن هیرودین در سلول های CHO به عنوان یک سلول یوکاریوتی بود. در مطالعه حاضر، قطعه 221 بازی ژن هیرودین در وکتور pcDNA3.1(+) کلون گردید. وکتور نوترکیب هیرودین در سلول CHO با ا...
متن کاملکلون کردن اپی توپ های خطی تحریک کننده ی لنفوسیت T آنتی ژن EG95 اکینوکوکوس گرانولوزوس در وکتور pGEX4t1 و بررسی بیان آن با روش SDS-PAGE
زمینه و هدف: انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس عامل بیماری مشترک بین انسان و دام به نام کیست هیداتیک یا هیداتیدوزیس است؛ موفقترین واکسن نوترکیب علیه این بیماری از کلون کردن ژن کد کننده آنتیژن 25 کیلو دالتونی آن یعنی EG95 در وکتور pGEX میباشد که ایمنی سلولی و همورال قابل‌توجهی را در گوسفندان ایجاد کرده است اما با توجه به نقش ایمنی سلولی TH1 در غلبه بر این بیماری و نقش اپیتوپهای خطی در تحریک این نو...
متن کاملکلون کردن اپی توپ های خطی پیش بینی شده آنتی ژن تروپومیوزین اکینوکوکوس گرانولوزوس برای لنفوسیت های t در وکتور pegfp-n1 و بررسی بیان آن در رده ی سلولی cho
اکینوکوکوس گرانولوزوس انگلی است که آلودگی با مرحله لاروی آن سبب ایجاد بیماری هیداتیدوزیس در انسان و نشخوارکنندگان می شود؛ تاکنون نزدیک به ده ژنوتیپ از این انگل شناسایی شده است. کشور ایران جزء مناطق با شیوع بالا است، بر این اساس مقابله با این انگل از لحاظ بهداشت جامعه اهمیت خاصی دارد. آنتی ژن های متفاوتی در مراحل مختلف زندگی این انگل بیان می شود، که یکی از آنها تروپومیوزین است. مطالعات پیشین نشا...
منابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
ارمغان دانشجلد ۲۰، شماره ۸، صفحات ۶۶۶-۶۷۶
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023